Micro Arte (I) - La piel humana

Adaptador réflex para el ocular

Empezamos nueva sección...y veremos cuanto dura. Pero creo que nos puede dar muchas alegrías y resultar muy interesante. El otro día revisando mis preparaciones de histología bajo el microscopio y un nuevo accesorio que me permite conectarlo a la réflex (mi otra gran pasión). Me di cuenta que bajo esas lentes hay imágenes realmente interesantes, desde el punto de vista fotográfico, pero también desde el punto de vista científico.

Vídeo del viernes: La mitosis en contraste de fases

Hace un par de semanas que no publicamos nada en esta sección, lo sé, también sé que no es viernes, si no sábado…pero espero que nos podáis perdonar algún día. Ahora mismo estoy rodeado de apuntes…y tal y como entra el sol por la ventana, el calorcito y las ganas de la gente de salir a pasear…me transporto inmediatamente a esos días en los que aprovechaba cada minuto al máximo para preparar el selectivo, los exámenes finales de Bachillerato... Por eso hoy voy a dedicar el vídeo de hoy a todos aquellos que ahora mismo estéis en esa situación, que es dura, pero que la mayoría supera y además con buenos resultados.

El vídeo tan solo dura 1 minuto, pero espero que os ayude con algo que suelen preguntar en el selectivo de Biología, la mitosis y sus diferentes fases…en este vídeo realizado con un microscopio de contraste de fases podréis ver cuál es el estado de los cromosomas en cada una de esas etapas. ¡A disfrutarlo!

¿Qué tienen las termitas en las tripas?

 

Muchos de vosotros diréis, ¡Anda ya! ¡Qué pregunta más tonta! Pues madera…En parte tenéis razón, pero las termitas, y algunas cucarachas, esconden en sus entrañas algunas cuantas cosas más aparte de madera, y son imprescindibles para su supervivencia...Si queréis saber más seguid leyendo después del salto…

El uso de la GFP como Chivato en Biología celular

La GFP o green fluorescent protein es una proteína producida por la medusa Aequorea victoria que emite bioluminiscencia en la zona del verde del espectro visible. El avance en las técnicas de biología molecular han permitido aislar este gen y en la actualidad es un marcador muy común en biología molecular y celular, además mediante modificaciones en la secuencia de aminoácidos mediante mutagénesis dirigida se ha conseguido variar el espectro de emisión de manera que en la actualidad hay GFP que emite en el amarillo (YFP) o en el rojo (RFP).







  

Este gen de la GFP mediante técnicas de biología molecular e ingeniería genética puede combinarse con otros genes. De manera que si queremos transformar o transfectar (en el caso de eucariotas) nuestras células con algún tipo de gen podemos usar la GFP como marcador. Tan sólo hay que poner en pauta la GFP con el gen de interés bajo un mismo promotor. De esta manera aquellas células que hayan incorporado el DNA con nuestro gen de interés podrán ser detectadas bajo un microscopio de fluorescencia porque emitirán un brillo verde al ser excitadas por la luz. Todas aquellas células que expresen la GFP estarán expresando el gen que está controlado bajo el mismo promotor, aunque la traducción de este gen no de lugar a ningún cambio perceptible a través del microscopio.

Una de las principales ventajas de la GFP es que no daña la viabilidad celular, de manera que si en un  cultivo de células que han sido sometidas a un proceso de transfectación el porcentaje de células transfectadas ha sido bajo pueden aislarse aquellas que estén brillantes mediante una micropipeta y establecer una línea de cultivo celular con ellas.

La GFP en la actualidad tiene múltiples usos y múltiples combinaciones en la actualidad, tanto como para llenar páginas y páginas con ejemplos. No obstante las fotos que os voy a colgar son de la práctica que hice la semana pasada en biología celular. En este caso se transfectaron células HEK 293 T con un plásmido portador de la GFP mediante dos protocolos ligeramente distintos para ver cuál de los dos era más efectivo a la hora de transfectar.

Para ver los resultados simplemente se ha utilizado un fluorocromo para DNA, el DAPI (color azul) y la propia bioluminiscencia de la GFP. Aquellas células que hayan incorporado nuestro gen de la GFP (y expresado) serán de color verde brillante. Ahora tan sólo queda ver la proporción entre células que lo han incorporado (verdes) del total de células que se pueden contar gracias al marcaje con DAPI que nos marca los núcleos. Aquí tenéis algunas de las fotos obtenidas:



























Células con DAPI: núcleos marcados en azul para hacer el recuento total de células

 

































Células con GFP: es la misma foto anterior pero con el filtro verde en el microscopio de fluorescencia







































 
Superposición de ambas fotos:

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Von kossa y azul alcián

 

El haber terminado los exámenes me ha permitido desenpolvar aquellas preparaciones que tuve el placer de realizar durante las prácticas de Técnicas microscópicas.

Una de las preparaciones que mejor resultaron dieron fueron las que utilizamos la técnica de von Kossa y Azul alcián. Ambas técnicas son de tipo histoquímico. En el caso de von Kossa se produce una reacción en que las preparaciones que contengan fosfato cálcico, como son las que presentan mineral óseo, con el nitrato de plata conducen a la formación de un fosfato de plata, en presencia de luz la plata se reduce a plata metálica, de color marrón/negro y es fijada con un fijador como el tiosulfato sódico como ocurriría con un revelado fotográfico de los tradicionales.

Por otro lado el azul alcián tiñe específicamente mucopolisacáridos como por ejemplo los que se depositan durante la deposición de la matriz cartilaginosa. Ya hablamos del cartílago en una antigua entrada en donde se describió la estructura histológica y que recomiendo que leáis para comprender mejor esta entrada.

En este caso la técnica ha sido aplicada sobre un embrión de ratón. El objetivo es observar el proceso de deposición de matriz ósea en la transición de cartílago a hueso. Durante la embriogénesis el primer esqueleto que se forma es de tipo cartilaginoso, y posteriormente la entrada de osteoblastos a la matriz inician la deposición de matriz ósea sobre la cartilaginosa, y en esta predomina el fosfato cálcico, de manera que al aplicar el von Kossa en estas zonas se observará el precipitado negro/marrón de la plata, mientras que en las zonas en las que aún quede cartílago quedará el tejido teñido de azul.

Realicé unas cuantas capturas con la cámara CCD del microscopio y los resultados fueron los siguientes:

1. Vista general de zonas esqueléticas del embrión (4X):

 

En ambas fotos se puede ver la transición del cartílago de color azul y la zona de precipitado de fosfato cálcico que mediante esta técnica se representan mediante un precipitado metálico.

2. Más detalles de la zona de osificación:



 
En estas capturas se pueden ver los condrocitos rodeados ya de matriz ósea y en la segunda foto el perfil de algunos osteoblastos.

Recordad que si hacéis clic sobre las fotos podréis verlas más ampliadas.

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Histoquímica y genes repórter

 

Cuando queremos detectar algún tipo de actividad enzimática en microscopía óptica se recurre a la histoquímica, que consiste en utilizar sustratos alternativos a los originales (ya sea de forma directa o por una reacción acoplada) para que dé algún tipo de pigmentación o coloración que pueda ser detectada por microscopía óptica, y si el cromógeno tiene carácter metálico o afinidad por éstos se puede detectar también mediante microscopía electrónica.

De entrada la histoquímica plantea ya una serie de problemas, porque si nuestro objetivo es diferenciar estructuras el tejido debe fijarse de manera que se conserve al máximo la estructura y en el caso de la microscopía electrónica la ultraestructura, pero muchas veces estos fijadores se basan en la formación de enlaces covalentes entre ciertos residuos de la cadena peptídica, como por ejemplo entre residuos de Lys en el caso de los aldehídos. Esto puede afectar a la actividad enzimática ya que los cruzamientos pueden alterar (o no) el centro activo y eliminar cualquier posibilidad de reacción dando lugar a un falso negativo. Lo más recomendable en la mayoría de los casos es recurrir a la bibliografía o poner a prueba tu propio protocolo, por que al fin y al cabo si nuestro enzima es capaz de soportar agresivos procedimientos de fijación e inclusión pero que conservan al máximo la estructura, ¿por qué no utilizarlos?.

Soy consciente que el título trata también sobre genes repórter y ¿alguna relación tendrán con la histoquímica no? Pues si la tienen.

Los genes “repórter” o testigo, son genes que se utilizan para detectar la transcripción y traducción de otros genes que por su naturaleza no son visibles al microscopio., la relación que guardan con la histoquímica es que muchas veces el producto de este gen testigo es un enzima que se puede detectar con un sustrato cromogénico.

Hay que tener en cuenta que un buen gen  testigo no debe estar presente en el  organismo de estudio ya que así nos evitaremos falsos positivos, o bien si existe de forma endógena que este se pueda bloquear de forma específica. La utilización de un gen testigo requiere la manipulación del genoma, mediante técnicas de clonación al embrión o al propio zigoto se le debe incorporar el gen para su posterior expresión i revelado.

Un ejemplo de gen testigo bastante utilizado es el gen de la beta galactosidasa, es archiconocido (por el operón lac de E. coli), no está presente en la mayoría de los organismos de estudio y además tiene sustratos cromogénicos y fáciles de detectar en microscopía óptica, como por ejemplo el X-gal que por la actividad galactosidasa del enzima da lugar a un producto de color azul, si sois lectores asiduos del blog lo recordaréis por su uso en el vector puC de E. coli del que ya hablamos en otra entrada.

Yo mismo he tenido la oportunidad de usar este gen testigo en prácticas de la asignatura de Técnicas Microscópicas. En este caso usamos el gen lacZ asociado al gen de la Mhc, la cadena pesada de miosina de D. melanogaster. Por tanto las moscas transgénicas expresaban un gen quimérico Mhc.-lacZ. en la misma ORF de transcripción de la miosina se transcribía el gen lac, dando lugar a betagalactosidasa en aquellos tejidos en donde se exprese este gen.

La cadena pesada de miosina tiene una elevada tasa de transcripción en el músculo, ya que forma parte de los sarcómeros y es la encargada de dar el golpe de potencia durante la contracción muscular.

Para revelar el gen testigo en las moscas las anestesiamos y cortamos la cabeza y el abdomen, dejando tan sólo el tórax con el objetivo de ver los paquetes de musculatura esquelética que participan en el movimiento de las alas. Tras unos minutos de incubación con X-Gal lavamos con tampón y simplemente montamos sobre porta y cubre aplastando la mosca o haciendo lo que se conoce como squash. Hemos obtenido los siguientes resultados (si hacéis clic sobre la imagen se abrirá otra ventana con la imagen en tamaño original para más detalle):

1. Vista general del tórax:

 

El azul que se puede ver al final de las patas es el resultado del revelado con X-gal, la musculatura de las patas es la única que ha dado coloración azul y lo más probable es que la musculatura del tórax no haya quedado también en azul porque la solución de revelado no haya penetrado en su interior correctamente.

2. Detalle de los paquetes musculares de las patas:



En esta captura a 40X ya se puede observar con más detalles los paquetes de fibras musculares incluso el bandeado que existe entre las zonas de solapamiento de actina-miosina en el sarcómero, que son más oscuras y las que sólo hay actina, que son las bandas claras. Aquí tenéis el detalle más ampliado:

3. Detalle del paquete de fibras:

Por cierto, ¿alguna vez no os habéis planteado por qué las moscas tienen tanta facilidad para adherirse a cualquier superficie? Creo que con esta foto tendréis la respuesta:

  Con esas minúsculas uñas las moscas son capaces de adherirse a cualquier rugosidad de la superficie.











Este ha sido tan sólo un ejemplo de uso de genes testigo pero hoy en día son la base fundamental en muchos campos de la investigación biológica ya que son los únicos capaces de mostrar a nuestros ojos lo que está ocurriendo en las células.

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El bagaje del biólogo

Papá Noel ha venido este año inesperadamente cargado, se ve que me he portado bien… y ha venido cargado además con un regalo que contribuye al bagaje de todo biólogo que se embarque en la gran aventura del estudio de la vida.

Debo darle las gracias a una personita muy especial y decirle que para lo que la necesite la tiene a su entera disposición. Con esta, ya tengo la pareja.

Muchas veces he oído a la gente ¿qué es más útil una lupa binocular o un microscopio?

Pues bien, cada uno sirve para una cosa. La lupa binocular posee, al igual que el microscopio, lentes oculares y lentes de objetivo. No obstante, mientras que los objetivos de los microscopios suelen ir de 4x a 100x, las objetivos de las lupas son de 2x y 4x, obteniendo aumentos de 20x y 40x si tenemos en cuenta las lentes de los oculares, en este caso las muestras se iluminan por luz transmitida o incidente, permitiendo ver los objetos con volumen y sin requerir ningún tratamiento de la muestra. Es ideal para observar de cerca las vicisitudes de invertebrados, flores etc. … para entre otras cosas poder clasificarlos.

El microscopio, mucho más potente, permitiendo observar objetos que por su pequeño tamaño escapan a la percepción del ojo humano, la luz siempre es transmitida y va dotado de un sistema de iluminación que condensa al máximo la luz para que una vez pase por la muestra el objetivo recoja la mayor luz posible, es decir capture la máxima información o lo que es lo mismo tenga la máxima resolución.

No obstante las muestras requieren una preparación compleja ya que deben ser lo suficientemente delgadas como para dejar pasar la luz sin problemas y la mayoría de veces requieren procesos de coloración.

Aquí os dejo unas fotos hechas con la lupa de un ácaro (así podéis compararlo con la imagen del microscopio que colgamos en la entrada  sobre la araña roja de los cítricos) y de una avispa y una mariposa de la colección entomológica que estoy preparando.

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Un microscopio de campo oscuro casero

Un microscopio d e campo oscuro se basa en la visualización de la luz dispersada por el objeto. A diferencia del microscopio convencional o de campo claro, en que la luz pasa a través de la muestra y

vemos el espectro que no ha sido absorbido por la muestra, en el microscopio de campo oscuro la luz no atraviesa de forma directa la muestra, si no que lo hace de forma lateral.

Cuando vemos a través del objetivo de uno de estos microscopios vemos que el campo de visión es oscuro (de ahí el nombre del microscopio), y se basa en un simple microscopio de campo claro con una pequeña modificación en el condensador, de forma que ningún rayo procedente de la fuente luz penetre a través del objetivo. Tan sólo pasarán por el objetivo aquellos rayos que hayan sido dispersados por las partículas más pequeñas presentes en la preparación y que se aprecian con gran intensidad sobre el campo oscuro.

Por tanto el microscopio de campo oscuro es un microscopio convencional con la peculiaridad de poseer una especie de disco metálico en el condensador que obliga a la luz a pasar por la periferia de este y no por el centro, de esta manera ningún rayo de luz atraviesa directamente la muestra obteniendo dicho efecto.

Ese anillo del campo oscuro se puede recrear con un poco de maña en casa con una moneda de 5 céntimos de euro o de 10 céntimos de euro. La moneda se sitúa en el centro del condensador, y ponemos el aumento 10X abriendo al máximo el diafragma y poniendo la máxima intensidad de luz y los efectos que veréis son realmente curiosos:

El ejemplo anterior es de un microscopio de campo oscuro de verdad y corresponde a un corte histológico de tejido vegetal, pero el otro día mi compañera Chantal y yo estuvimos trasteando con unos ácaros que había en unas naranjas y se nos ocurrió sacar una foto de campo oscuro con el método de la “monedita” y la verdad es que el efecto que se consigue es bastante curioso. Pero prefiero que las veáis en la entrada que está preparando  Chantal acerca de los ácaros.

Vorticela sp.

Hoy estaba mirando con la cámara nueva un poco de fango del fondo de mi acuario…me gusta ver los protozoos que danzan por allí. Hoy me he encontrado con una Vorticela. Por supuesto desconozco totalmente la especie, no soy especialista en protozoos ni nada por el estilo, pero si alguien que se pase por aquí es capaz de reconocer de qué especie se trata, o tiene alguna sospecha que no dude en dejar algún comentario que lo recibiré encontrado.

Por lo poco que he podido leer por internet se trata de una vorticela de vida solitaria, de pedúnculo contráctil, que suele vivir de forma solitaria, sin formar colonias y que es común en fangos ricos en materia orgánica. Aquí os dejo un video del individuo en cuestión:

Cámara de Microscopía

Hoy una entrada especial por mi nueva adquisición. Me acabo de comprar un ocular digital para el microscopio, y debo agradecer el esfuerzo que ha hecho Ángel Martínez en el precio. Muchas gracias por todo, la cámara va genial y aquí tienes una prueba de ello:

No es una cámara profesional ni a lo que estoy acostumbrado a trabajar en neurohistología, pero es más de lo que un estudiante modesto como yo se puede permitir y no habría sido posible sin la ayuda de Ángel. Espero poder deleitaros con mi nueva cámara y con nuevas capturas. (Si hacéis clic sobre la imagen se abrirá una ventana con la imagen a tamaño completo). Por cierto la imagen corresponde a una sección de la arteria con la capa endotelial, la túnica íntima, la musculatura lisa…

Tinción negativa y tinción de Gram

Sigo sin tiempo para escribir…Tantas prácticas juntas no me dejan tiempo ni para mirarme al espejo, no obstante os cuelgo dos fotos de un par de técnicas de tinción que hicimos ayer en microbiología. Disculpad por la mala calidad de las imágenes porque están hechas con un móvil ya que mi cámara de fotos ha desaparecido, como muchas otras cosas que desaparecen y desaparecerán en este mundo.

Os dejo también un par de links para que podáis reproducir las técnicas…ya sé que son de la wikipedia, pero servirán:

Tinción negativa de Bacillus sp. a 100x

La tinción negativa es el reverso del procedimiento de tinción usual: las células se dejan sin teñir, pero se colorea en cambio el medio que las rodea. Lo que se ve, por tanto, es el perfil de las células. La sustancia utilizada para la tinción negativa es un material opaco que no tiene afinidad por los constituyentes celulares y que simplemente rodea las células, tal como la tinta china (que es una suspensión de partículas de carbono coloidal) o la nigrosina (un colorante negro insoluble en agua). La tinción negativa es un modo satisfactorio de aumentar el contraste de las células en la microscopia óptica, pero su máxima utilidad está en revelar la presencia de cápsulas alrededor de las células bacterianas.

Tinción de Gram:

Para reproducir la técnica y descripción:

http://es.wikipedia.org/wiki/Tinci%C3%B3n_de_Gram

Página de microfotografía

Poco inspirado para escribir un post de los míos, pero no voy a dejar que termine el fin de semana sin recomendaros una web de microfografía que vale la pena:

http://www.telefonica.net/web2/ninosantamaria/index.html

El cerebelo

De vuelta al laboratorio, de momento provisionalmente, porque aunque es cierto que he terminado los exámenes empezamos un nuevo cuatrimestre cargado de prácticas y de seminarios, así que tengo que sacar el tiempo de debajo de las piedras.

Mientras esperaba a que se incluyeran unas rebanadas de cerebro de Tropidurus hispidus en tetraóxido de osmio he sacado unas cuantas fotos a mi primera inclusión de poliwax. En concreto cortes del cerebelo deTropidurus hispidus de 10 micras, si no me equivoco, aunque no lo puedo decir con total seguridad porque lo hice antes de navidad y ahora mismo no tengo la libreta en mis manos. Aquí dejo dos de las capturas que espero que sean de gran utilidad para aquellos que empiecen la asignatura de organografía e histología animal.



Para ampliar imagen pinchar sobre ella.

Como se puede ver en la foto se pueden distinguir claramente las 3 capas. En primer lugar la capa granulosa (1), en segundo lugar la capa de células de Purkinje (3) y finalmente la capa molecular (2).

A continuación tenemos una ampliación a 40X para ver las células de Purkinje:



Poco a poco os iré poniendo al día de mis batallitas por los laboratorios…

Microscopía de Barrido (II)

De momento voy sobreviviendo a los exámenes, sin más tiempo que para colgaros unas cuantas fotos más de las prácticas de Organografía Vegetal.


Pelos peltados de Olea sp.

Esporas de Selaginella sp.

 

Fibras del esclerénquima de Chamaerops sp.

Ya iré colgando más imágenes cuando pueda…y también haré entradas más elaboradas…de momento me toca estudiar. Suerte a todos aquellos que estéis en exámenes.

 

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Microfotografía

A veces una imagen vale más que mil palabras...En este caso estamos viendo un corte transversal de una acícula de Pinus sp. con su respectivo conducto resinífero en el centro y la epidermis lignificada y estomas hundidos para soportar los largos periodos de sequía...no hace falta decir más...la imagen es capaz de describirse por sí sola...(si hacéis clic abre una nueva ventana con la imagen a tamaño original)

 

Neuronas motoras

Seguimos por el laboratorio, pero no tan a menudo como quisiese. Aprovecho para mostraros el resultado de semanas de trabajo, y no sólo mío, si no también de mis compañeros del departamento y de la Universidad de Sergipe en Brasil. Es cierto que en ocasiones el trabajo es realmente costoso, pero recompensa cuando vagando por la platina del microscopio, realizando las fotos para el atlas ves un par de células muy marcadas en un corte correspondiente ya a la región del tronco cerebral de Tropidurus hispidus. Cambio el objetivo a 40x y ahí están, un par de neuronas motoras que probablemente, por su situación tan cercana al cerebro, lo más probable es que se trate de neuronas motoras que inervan los músculos de la región del cuello, o bien la región de la mandíbula. 8 segundos en azul de toloidina pueden convertir una simple rebanada de tejido cerebral de 60 micras en un auténtico mundo por descubrir mostrándonos imágenes tan fascinantes como estas:

 

Esta imagen ha sido obtenida a 40 aumentos (para ver más detallada pinchar sobre ella y se abrirá un nuevo vínculo con la imagen a tamaño original).

 

Como ya os he dicho sigo trabajando de forma incesante e iré creando entradas entre los pequeños huecos que me permite la dura vida de estudiante (aunque muchos piensen que no lo es)

Rebanadas y más rebanadas...

En efecto, sigo de trabajo hasta las cejas, pero vamos obteniendo resultados. En entradas anteriores os conté que estaba haciendo un atlas histológico de lagarto brasileño. He terminado de cortar la secuencia completa y después de teñir toca registrar los datos y numerar las rebanadas y obtener fotografías. Algo que puede parecer fácil, pero que como se trata de algo muy específico requiere alrededor de 4 minutos por fotografía, a 3 fotos por rebanada, y alrededor de 60 rebanadas....es bastante. Mañana empezaré con la realización de las fotos, pero haciendo pruebas he obtenido ya algunas, y os voy a poner un pequeño adelanto:

 

 

Es una pequeña muestra del trabajo que estoy realizando...y que explica el porqué no puedo dedicar todo el tiempo que quisiera al blog, pero prometo que cuando empiece el nuevo curso habrá nuevas entradas que trates nuevos temas.

Tropidurus hispidus

Últimamente no tengo mucho tiempo de actualizar y llevar este blog al día, estoy con todo el papeleo de la Universidad y organizando el nuevo curso...pero cuando puedo saco algún hueco para ir contando os algunas cositas...

 

Este es el nombre de la especie de lagarto brasileño con el que estamos trabajando en neurohistología. Normalmente en mi grupo de investigación han trabajado con reptiles, y en concreto con Podarcis hispanica o lagartija común. Pero la presencia de dos fantásticos investigadores de Brasil ha hecho que nos interesemos por Tropidurus hispidus y permitir así la puesta en común de datos y comparar la con la lagartija común.

 

Uno de los campos en los que están más interesados es en la neurohistogénesis en el córtex medial que se produce en estos reptiles, al igual que en Podarcis hispánica. 

 

En mi caso aún estoy empezando con ellos y hago cosas bastante sencillas pero que requieren cierta habilidad. Uno de los proyectos en los que estoy participando es en la elaboración de un atlas histológico del cerebro de Tropidurus hispidus. Nos envían los cerebros perfundidos desde la Universidad Federal de Sergipe en Brasil, con las dificultades que eso conlleva ya que las muestras sufren abundantes cambios de temperatura que en ocasiones afectan a los tejidos dificultando así el corte con el vibrótomo a pesar de haber sufrido una buena perfusión.

El proceso de corte y montaje de las muestras en los portas es largo y costoso pero después de todo el proceso el resultado es altamente gratificante, obteniendo imágenes muy similares a estas (no corresponden al trabajo que estoy llevando a cabo porque aún no lo hemos terminado).

 

 

Si os interesa el tema recomiendo la lectura de este artículo:

 

Postnatal neurogenesis in the medial cortex of the tropical lizard Tropidurus hispidus

M. Marchioro^a, J.-M. de Azevedo Mota Nunes^a, A.M. Rabelo Ramalho^a, A. Molowny^b, E. Perez-Martinez^b, X. Ponsoda^b and C. Lopez-Garcia^{b, ,}

^aLaboratorio de Neurofisiologia, Departamento de Fisiologia, Universidade Federal de Sergipe, São Cristóvão-SE, 49100-000, Brazil ^bLaboratorio de Neurobiología Celular, Facultat de Biología, Universitat de Valencia, C/Dr. Moliner 50, 46100 Burjasot, Spain

Gracias a ellas no nos desangramos....

Últimamente ando un poco corto de ideas, tengo muchas cosas en la cabeza pero que tienen poco que ver con la biología así que ando bastante escaso de ideas...

 

Las plaquetas son componentes exclusivos de los mamíferos, tienen forma irregular y son fragmentos de otra célula precursora llamado megacariocito. Por tanto no poseen núcleo, ni son células, tan sólo son fragmentos de citoplasma rodeados de membrana que contienen en su interior diversas granulaciones con contenidos de diferente naturaleza que comentaré después, pero no hay que olvidar que derivan de una célula que sí poseia núcleo y que por tanto el contenido de las plaquetas no está presente al azar si no que viene predeterminado por el código genético de su célula precursora.

 

Los gránulos que posee en su interior se clasifican según su aspecto en microscopía electrónica, a partir de la cual se puede deducir algunas de las sustáncias que contienen, entre ellas enzimas hidrolíticos, factores que aumentan la permeabilidad vascular, fibrinógeno plaquetario y factores de coagulación como el factor plaquetario 4. Este último tipo de sustáncias comentadas son las que dan lugar al proceso que desarrollan este tipo de elementos en el torrente sanguíneo, intervienen en el mecanismo de la hemostasis o coagulación. El proceso ocurre de forma ordenada y se repite cada vez que se produce algún tipo de herida en un vaso sanguíneo:

 

- se adhieren unas plaquetas a otras y a la vez a la superficie dañada, sobre todo a las fibras colágenas presentes

 

- se libera tromboplastina tisular (sustancia formadora de coágulos) que no está presente en las plaquetas pero que es liberada por las células endoteliales de los vasos por la acción del factor plaquetario 3 que sí es liberado por las plaquetas.

 

- la tromboplastina en presencia de Ca++ transforma la protrombina presente en la sangre en trombina .

 

- esta trombina convierte el fibrinógeno de la sangre en fibrina y permite la formación de tramas, de redes, que engloban las plaquetas y los eritrocitos en forma de coágulo.

 

Todo este proceso permite la creación de una barrera que impide que la sangre se derrame al resto de tejidos y provocar hemorragias internas que nos producirían una muerte segura...tan sólo son fragmentos de citoplasma....pero sin duda esenciales para nuestras vidas...

El bazo la mayor acumulación de tejido linfoide de nuestro organismo

En la especie humana el bazo es el único órgano linfoide interpuesto en la circulación sanguínea. Está situado en la cavidad abdominal, directamente debajo del diafragma, de forma oblicua siguiendo la dirección de la décima vértebra.

Este órgano tiene básicamente dos funciones en nuestro organismo, en primer lugar es un órgano de defensa en cuanto a organismos externos que puedan penetrar en la sangre, como la sangre circula a través de él (es una auténtica bolsa de sangre) las células inmunitarias que se sitúan en su interior son capaces de activarse para hacer frente a cualquier infección sanguínea. La segunda función que realiza este órgano es la destrucción de los eritrocitos más maduros, desgastados por el uso. Hay que recordar que estas células no poseen núcleo, y por tanto el control del ciclo celular y la apoptosis por si mismas quedan anuladas.

 

En cuanto a su esrtructura histológica (que es el objetivo de esta entrada) en el bazo podemos encontrar tres partes principales que lo van a caracterizar. Por una parte tenemos la cápsula de tejido conjuntivo denso, que recubre todo el órgano y que emite prolongaciones hacia su interior en forma de tabiques que reciben el nombre de trabéculas. Este tejido conjuntivo presenta algunas fibras musculares lisas que en la especie humana son escasas.

 

La siguiente parte es la pulpa roja, que ocupa la mayor parte de la superficie, esta pulpa roja está formada por cordones esplécnicos de tejido conjuntivo linfoide, y entre estos cordones se sitúan los capilares sinusoidales, es en esta zona en donde se va a producir la eliminación de los glóbulos rojos. La siguiente zona es la pulpa blanca, de carácter discontínuo.Ésta zona está constituida por tejido linfático, en los nódulos linfáticos predominan los linfocitos de tipo B, mientras que en las zonas periarteriales predominan los linfocitos T, por tanto la distribución de las células inmunitarias no son para nada aleatorias.

 

Todo esto está muy bien, y lo podemos encontrar en cualquier libro de histología u organografía, ¿pero cómo se ven y diferencia a través del microscopio óptico? Esto es lo que he estado haciendo durante esta tarde, intentando fotografiar este órgano.

 

A 4x podemos ver los nódulos linfáticos (1), la zona pulpa roja (2) y la cápsula de tejido conjuntivo denso (3) que proyectan las trabéculas hacia el interior del órgano, que como podemos ver en la siguiente microfotografía:

A 10x podemos ver con más detalle uno de los nódulos linfáticos rico en linfocitos B en color amarillo y una de las trabéculas remarcada mediante una línea discontinua marrón (he descartado hacer una foto a 40x porque el corte no es bastante fino):

Finalmente para cerrar la entrada una microfotografía del corte de una de la artéria central cargada de eritrocitos, mucho de los cuáles ya no siguen circulando después de pasar por este órgano: